Валерий Геннадьевич Зайцев провел мастер-класс в ИЦ “Бирюч”, посвященный повышению чувствительности методов окрашивания белка при электрофорезе.

В биотехнологии оценка идентичности и чистоты целевого белкового продукта – распространенная задача. Белковый электрофорез в полиакриламидном геле (ПААГ) – один из стандартных методов для ее решения. Однако после очистки содержание примесей часто значительно меньше, чем целевого белка, что требует высокочувствительных методов окраски для их выявления, особенно если примеси присутствуют в следовых количествах. Традиционное окрашивание белков красителем кумасси ярко-синим обладает рядом недостатков:- относительно сильное фоновое окрашивание;
– длительный период отмывки геля от красителя;
– использование летучей уксусной кислоты и высоких концентраций спиртов.В ходе мастер-класса провели электрофорез чистых препаратов белков с различной молекулярной массой и сравнили несколько методов окрашивания одинаковых гелей. Результаты показали:- простой и недорогой рецепт окрашивающего реагента оказался менее чувствительным, чем классический протокол, но сразу обеспечил полное отсутствие фонового окрашивания и не требовал отмывки;
– рецепт с фосфорной кислотой вместо уксусной не только дал гели почти без фонового окрашивания, но и продемонстрировал более высокую чувствительность, чем традиционный краситель. Заключение: Альтернативные протоколы окрашивания позволяют не только быстрее получать результаты анализа белков, но и выявлять меньшие количества белка на геле. Благодарим Валерия Геннадьевича за мастер-класс и всех участников за активную работу!